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细胞的冻存和复苏实验用试剂一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快，使之迅速通过细胞zui易受损的－5～0℃，细胞仍能生长，活力受损不大。目前常用的保护剂为二甲亚砜（DMSO）和甘油，它们对细胞无毒性，分子量小，溶解度大，易穿...
2016 1-20
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细胞培养过程中的注意事项及试剂配制 一.常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、...
2015 12-23
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细胞冻存解决方案细胞冻存解决方案细胞冻存步骤：1.预先配制冻存液：10%DMSO+90%胎牛血清，4℃冰箱保存预冷；2.用胰酶对细胞进行消化：倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基，PBS冲洗两次，用胰酶消化细胞（尽可能温和）；3.再次用*培养液悬浮细胞，将预冷的冻存液加入消化*的细胞中，用滴管轻轻吹打混匀。4.在每支冻存管中加入1ml细胞液，密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力，如果有程序降温器（放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐）；或者...
2015 12-8
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神经干细胞培养基自然筛选法多年的研究使神经干细胞的分离培养，体外扩增等技术日臻完善。现在科学家们已克隆了人体的神经干细胞，并将其在体外培养，扩增。zui近，有研究又将人的神经干细胞成功地植入了胚胎鼠脑中，这些干细胞研究在人体的应用，使其从实验室逐步走向了临床，为人类神经系统疾病的治疗提供了一个全新的视角。神经系统疾病的基因导入治疗如前所述，癌基因转染干细胞形成的永生细胞系不仅可以成功地整合于植入部位，而且可以稳定地表达转染的外源性基因，这就为中枢神经系统的基因治疗提供了一个性能*的载体。利用温度敏感性...
2015 10-28
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心肌细胞分化培养基的作用由于人类心脏电生理学特性，其心肌细胞的去极化时程与啮齿类动物差异很大。例如，人心脏生理条件下每分钟搏动60-90次，而小鼠为500-700次，大鼠为300-400次。因此，在小动物心肌细胞模型中发现的理论，当需要进一步在验证时，由于缺失人类心肌系统，只能取用其他大型哺乳动物的原代分离心肌细胞替代。而这些细胞的来源都不稳定，实验结果的重复性也无法保证。由于*的原因，基本没有可能获得并培养原代人心肌细胞，以心肌细胞为代表的心肌细胞，是目前和将来*的人源心肌细胞来源。心肌细胞可以极...
2015 10-27
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心肌细胞培养基的广泛应用心肌细胞，是目前和将来*的人源心肌细胞来源。由于人类心脏的生化和分子生物学特性，其心肌细胞的很多核心功能蛋白与小鼠等模式动物不同。例如，小鼠心肌细胞主要表达α重链肌球蛋白，以适应高频率的搏动，而人类心肌细胞主要表达β重链肌球蛋白，适应低频率的搏动。此外，以Ito和Ik为代表的钾离子通道在不同种属动物及人类心肌细胞间的表达和功能差异极大，对于动作电位形成的贡献也各不相同。传统研究采用的心肌细胞,主要是采用从新生或成年动物心脏分离获得的原代心肌细胞。同时，此类细胞还存在:分离技术...
2015 10-19
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干细胞无血清培养基有什么优缺点干细胞无血清培养基和试剂在培育无脊椎动物和哺乳动物细胞来备置单克隆抗体方面被广泛的应用，还有病毒抗原和重组蛋白等。无血清培养基是不用增加血清就能够保持细胞在体外比较长时刻成长繁衍的组成培养基。大部分的干细胞无血清培养基拥有向细胞中转输离子的转铁蛋白和调理葡萄糖摄取量的胰岛素，还有一部分蛋白质和清蛋白，纤维蛋白，胎球蛋白等，综上所指的蛋白在细胞培育中具有各自不一样的功用，如供给细胞贴壁所要的基质，抗生物反应器剪切力，供给细胞贴壁所需的基质，作为脂类和其他生长因子的载体等。干细胞...
2015 8-26
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神经干细胞培养基的作用神经干细胞是具有多潜能性的细胞，它具有分化成有限细胞类型和构建组织的能力。目前已知，神经干细胞在体外特定的条件下可被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞和少突胶质细胞。笔者在试验时曾取小鼠中脑神经干细胞在体外进行诱导分化，为证实其多分化潜能，在撤掉丝裂原并加入血清分化1周后，对细胞进行免疫组织化学鉴定，发现分化的细胞中有神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白、和小胶质细胞特异性抗原标志Gal-C阳性缃胞。此三种细胞已成为鉴定神经干细胞分化能力的特异性指标。目前，神经干细胞的分离...
2015 8-20
