NK细胞活化扩增方法，Corning版

NK 细胞活化

1.  热灭活自体血浆，56°C，30min。离心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血浆，培养备用。
2.  至少5倍体积的PBS（不含钙镁）清洗PBMCs。室温离心500xg，10min，收集PBMCs。 PBMCs稀释到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培养基配比1.8mL NK活化添加剂和10%自体血浆。
3. 预包被T-75培养瓶使用前，用PBS（不含钙镁）清洗两次。添加30 mL PBMC悬液到预包被T-75培养瓶，37°C，5% CO2培养。

注意：第六天之前，如果培养基变黄，细胞密度超过2.0 x 10⁶ cells/mL，需要添加新鲜的NK活化培养基配比10%自体血浆，保持细胞密度在在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之间。

NK细胞扩增

1.  培养第六天，培养液离心，适量NK扩增培养基（1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆）重悬细胞，再转移到T-225培养瓶或透气细胞培养袋。
2. 每隔两三天，根据细胞扩增状态，培养体系中添加新鲜的NK扩增培养基（1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆）保持细胞密度在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之间。
3.  细胞总量到达2 x 10⁹ 后收获细胞用于CCK8 杀伤力和免疫表型检测。

注意：整个实验过程中，细胞悬液吹打和培养容器拍打都要轻柔，以避免细胞损伤，保持细胞活性。

Corning® NK细胞活化扩增培养套装

英文名：Corning® NK Expansion Kit

中文名：Corning® NK细胞活化/扩增培养套装

应用：NK细胞活化扩增

品牌产地：美国Corning

保存：2°C - 8°C

NK细胞是当今免疫治疗常用的细胞。但是NK细胞培养操作难度大，对培养条件、培养技术要求很高，难以获得高纯度能的活性细胞。 Corning NK细胞活化/扩增培养基套装由多个组分组成，为 NK细胞培养提供简便的操作方案。使用该套装所获得细胞数量产量高，活性高，具有很高的杀伤效应。

产品组成

NK细胞活化培养基

NK细胞活化添加剂

NK细胞扩增培养基

抗体预包被T75细胞培养瓶

细胞培养袋

产品特色

扩增能力强，在14天内可达到100倍扩增

效应细胞比例高，可达80％

操作方便

产品订购信息