进口胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
进口胎牛血清质量检定指标:
1、进口胎牛血清内毒素检测:凝胶法和动态浊度法 要求内毒素含量≤10EU/ml。
2、化学检定:包括渗透压(240~340)、pH(7.0~8.0)、总蛋白含量(3.5~5.0%)、血红蛋白 (≤0.02%)。
3、进口胎牛血清微生物检查:细菌和真菌——直接培养法、噬菌体——噬斑法和增殖法 支原体——培养法和DNA染色法 、牛病毒——细胞培养法。要求均为阴性。
4、促细胞生长测定:(SP2/0-Ag14标准规定)
a.大增殖浓度≥1.0×106个/ml、倍增时间≤20小时 克隆率=(阳性孔平均数/培养孔总数)×100%。
b.贴壁效率( VERO细胞、二倍体细胞等);10%血清――50或100个细胞/孔。
c.贴壁效率(%)=(每孔克隆平均数/每孔存活的培养细胞平均数)×100 相对贴壁效率=被测血清贴壁效率/参考血清贴壁效。
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
进口胎牛血清其功效与作用有以下几点:
1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物;
2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力;
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用;
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源;
5、起酸碱度缓冲液作用;
6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。