随着行业的发展，病毒载体的生产成为细胞和基因治疗领域的核心技术.而转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的小伙伴离不开的话题。但是可能大家经常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……

我们熟知的方法中脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较广泛的是带正电的阳离子脂质体转染试剂，方法操作简单，重复性好，在体外转染中有很高的效率，但具有一定的细胞毒性，可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响，需要去除血清。

阳离子聚合物的转染试剂，带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类，细胞毒性较小，但其转染效率都高于脂质体转染，适用也较为广范。

阳离子聚合物 - 聚乙烯亚胺（PEI）是目前报道的工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白领域泛使用的基因载体和转染试剂。PEI 制备简单，价格便宜，有线状和枝状两种商业试剂可选，是瞬时转染放大转染试剂的*，是非常有潜力的非病毒质粒载体试剂。

PEI Prime™️是美国SEROCHEM 公司研发的一 种高效、低毒、经济的新型转染试剂。用于抗生素, 蛋白, 和病毒载体的转染剂 - 聚乙稀亚胺(PEI)。PEI是的转染方法并有效的用于在CHO和HEK细胞类型。

本转染试剂操作简单，5 分钟实现快速转染，在 HEK293T 细胞中转染效率可达 95%以上。性价比高，适合常规 的转染、蛋白表达、病毒包装等大规模的转染。

产品特点

高效、无毒：转染效率高，重复性好，无明显的细胞毒性；

操作简单：使用方法和市面常见同类产品*一致；

应用广泛：贴壁细胞和悬浮细胞都适用，即可瞬时转染，也可稳定转染

操作步骤

以6孔板为例

1.  转染用细胞准备：转染前接种HEK293T细胞于合适的容器中，培养约24h，细胞密度70%-95% 为宜，活细胞密度为（1.5至2.0）x 10⁶细胞/ mL确保细胞处于状态 。

2. 将活细胞密度稀释至1.05 x 10⁶细胞/ mL；

3. 多次颠倒pDNA和PEI Prime™1 mg / mL试剂容器以充分混合。

4. 对于每个要转染的培养物，将1μgpDNA转移至干净的小瓶中。用新鲜培养基稀释至40μg/ mL。

5. 对于每个要转染的培养物，将3μLPEI Prime™1 mg / mL转移至干净的小瓶中。使用培养基稀释至120μg/ mL。

6. 将稀释的pDNA和PEI Prime™混合在一起。倒转几次，让其在室温下静置10分钟。在使用前，轻轻将封闭的容器倒转一次。

7. 每转染95 mL培养物，使用5 mL pDNA / PEI混合物。混合时逐渐将混合物添加到培养物中。

8. 转染后，培养 HEK293T 细胞 18-72 小时后对细胞进行鉴定或加入抗生素筛选稳定克隆。

                                                    HEK293T细胞转染48h荧光图

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