Illumina平台NGS工作流程知多少？

新一代测序工作流程包括三个基本步骤：文库制备、测序和数据分析。了解每一步骤的基本知识以及如何规划您的NGS工作流程。

NGS工作流程的准备工作

大多数NGS工作流程都需要在提取后进行QC步骤。我们推荐使用紫外分光光度法来评估纯度，使用荧光分析法进行核酸定量。

NGS工作流程的第1步：文库制备

为了节省资源，可以将多个文库混合在一起，在同一运行中进行测序——该过程称为多重分析。接头连接过程中，标签序列（或说“条形码”）会添加到每个文库。这些条形码可以在数据分析过程中区分文库。

NGS工作流程的第2步：测序

在边合成边测序（SBS）过程中，化学修饰的核苷酸会通过天然的互补性与DNA模板链结合。每个核苷酸都有一个荧光标记和一个可逆终止子，后者可以阻止下一个碱基的掺入。荧光信号可以指示出加入的核苷酸种类，终止子被切割后，下一个碱基才可以继续结合。

NGS工作流程的第3步：数据分析

如今，您可以使用直观的数据分析应用程序来分析NGS数据，无需进行生物信息学培训或另外雇佣实验室人员。这些工具可以进行序列比对、变异检出、数据可视化或解读。