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细胞冻存液配制比例是多少

更新时间:2021-10-18 点击次数:1908
   细胞冻存液是适用于多种哺乳动物细胞和间充质干细胞的冻存。该款冻存液所有成分均为原料药级别,生产过程遵循ISO9001体系,严格执行cGMP操作标准,符合细胞治疗标准。
  细胞冻存液比例:
  冻存液配制:
  20%胎牛血清、10%DMSO、70%1640培养液;或90%血清、10%DMSO,更可防止细胞内冰晶形成。
  DMSO在4℃时对细胞无明显毒性,分子量小、溶解度大、易透过细胞膜,降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度,使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩;DMSO与水分子结合,可使冰点下降,减少细胞内冰晶的形成,从而减少冰晶损伤.
  FBS:DMSO 不是必须9:1, 这种方式太了,FBS很贵,且一般务必要,除非是贵重的淋巴细胞等。 一般用*培养基(含10-20%FBS)与DMSO按一定比例冻存,例如9:1  或95:5冻存,有一定偏差也是可以的。
  另外,还有一些是无血清培养的细胞,也不能添加血清,这时就用无血清培养基(根据细胞特性定制的培养基)加入5-10%的DMSO来冻存。
  总之,不是必须FBS:DMSO=9:1, 那是很古老的文献资料里常提到的冻存方案。
  细胞类型和细胞株个体特性。不同细胞有其冻存条件,不尽相同,需参考说明书和文献。如果发现细胞冻存后状态不佳,需要自己摸条件,或考虑污染和培养条件问题。
  使用的注意事项:
  1、使用前需确保细胞冻存液*融化,并轻轻混匀。融化后的细胞冻存液置于4℃保存。
  2、请确保冻存前细胞生长情况良好,例如处于对数生长期的细胞,并且冻存时存活率大于90%。
  3、建议细胞冻存在液氮中,可以长时间进行保存。如果置于-80℃保存,保存时间大约为1年。
  4、请使用耐受有机溶剂的笔进行标记,以防做的标记被酒精或异丙醇等有机溶剂擦掉,而不能辨识。
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