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ELISA试剂盒操作细节常见问题整理

更新时间:2022-01-06 点击次数:1777
1)问:是不是空白对照就是什么都不加?  
答:不加样本,不加样本稀释液,不加酶标试剂,其他都可以加。  
2)问:样本稀释液是配好的吗?  
答:样本稀释液是配好的。  
3)问:样本稀释液可以用来直接稀释血清吗?  
答:可以的,直接加40ul就可以了。  
4)问:洗涤液是浓缩的;是一次配好,还是现配现用?谢谢。  
答:浓缩的,现配现用。  
5)问:加入的显色液A\B分别是什么物质?作用原理?  
答:显色剂A和B,是经典的TMB显色系统。具体原理可以参考免疫方面的教科书。在这里不详细列出。  
6)问:终止液是什么物质?如何做到终止反应的?  
答:终止液是2mol的硫酸溶剂。终止反应也是和原理相关。这个参考教科书!  
7)问:稀释液是什么成分?  
答:标准稀释液是PBS(PH=7.2-7.4,浓度是0.01mol/L)。样本稀释液是含有0.5%BSA的PBS(PH=7.2-7.4,浓度是0.01mol/L)。  
8)问:需要避光保存的试剂是哪个?  
答:需要避光的是显色液B。  
9)问:试剂盒从冰箱取出后,室温放置会影响其效果吗?  
答:试剂盒在做实验前应该要室温平衡一小时。短时间(3、4小时)没有任何影响。  
10)问:样品研磨后是立即离心,还是在4度冰箱里提取几个小时以后再离心?  
答:样本研磨后立即离心即可。  
补充:5%BSA封闭液(BlockingBuffer)适用于WesternBlotting、ELISA以及免疫组化实验中非特异性蛋白结合位点的封闭。

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