技术文章
当前位置:
主页 >
技术文章 > 细胞培养基pH值改变的原因及解决办法
细胞培养基pH值改变的原因及解决办法
更新时间:2022-04-12 点击次数:9234
pH值升高都有哪些原因?
①随着培养基开盖时间的增长,pH值会不断升高;
---培养基中CO2挥发,导致溶液碱性升高。
②培养基存储条件不合适;
③操作时间过长。
如何解决pH值升高的问题?
①*培养基尽量现配现用,2~8℃下保存一周内使用完;
②培养基在2~8℃下避光保存;
③避免操作时间过长。操作时间快速、减少同时进行的实验数量。
pH值降低都有哪些原因?
①在细胞生长过程中,产生细胞代谢产物乳酸,乳酸蓄积,pH值通常会下降;
②培养瓶盖拧得过紧;
---细胞代谢产生的CO2无法溢出,溶解于培养基中导致酸性变强。
③NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够;
④细菌、酵母或真菌污染等。
如何解决pH值降低的问题?
①及时传代、提高传代比例或降低血清量;
②适当松开瓶盖;
③增加培养液中NaHCO3浓度或减少培养箱内CO2浓度(NaHCO3含量在2.0g/L到3.7g/L之间时,对应的CO2浓度为5~10%);
④若是微生物污染造成的,需及时丢弃培养基,并对操作、培养空间进行消毒处理。
在什么情况下选择HEPES缓冲体系呢?
在开放式培养条件下(非5%CO2的培养环境),细胞代谢产生的CO2迅速溢出,pH迅速升高,使用HEPES缓冲液体系,可以防止培养基pH值迅速变动。