盘点RNA降解的常见原因
更新时间:2023-11-02 点击次数:2517
RNA降解是一个常见的问题,特别是在进行RNA提取和下游分析时。以下是导致RNA降解的一些常见原因及其相应的解决方案:
新鲜细胞: 裂解液不足会导致裂解不充分,从而使部分RNA未被释放出来。为了确保RNA释放出来,应在裂解过程中加入足够的裂解液。
新鲜组织: 若组织中含有内源性核酸酶,则很难避免RNA酶的降解。建议采用的方法是在液氮条件下将组织研磨,并且,在匀浆时采用更多的裂解液。
冷冻样品: 如果样品未经液氮速冷直接转移到-70℃冰箱存放,会使RNA缓慢降解。为了避免这种情况,应在样品取材后迅速置于液氮中冷冻存放,然后转移到-70℃冰箱存放。
外源RNA酶的污染: 实验试剂、器械等实验用品应采用DEPC水灭菌处理,以消除外源RNA酶的污染。
内源RNA酶的污染: 抑制剂失效或者用量不够,以及实验样品过多或匀浆温度过高都可能导致内源RNA酶的污染。为了减少内源RNA酶的影响,可适当增加抑制剂的浓度,确保样品处理时处于适宜的温度。
长时间暴露于高温或光照环境下: RNA容易受到紫外线和高温的影响而发生降解,因此在实验过程中应避免样品暴露于高温或光照环境下。
提取过程中的反复冷冻解冻: 这种情况会破坏RNA结构,使其更容易受到酶的作用而降解。因此,在RNA提取过程中应尽量减少冷冻解冻次数,最好一次性完成整个提取过程。
产品名称:PAXgene全血RNA管 样本采集保存
产品货号:762165
产品规格:2.5mL,100支/盒
PAXgene血液RNA管旨在立即稳定细胞内RNA,从而产生准确且可重复的基因表达数据。PAXgene血液RNA管含有一种专有试剂,可在采集后立即稳定细胞内RNA。细胞内RNA在室温下稳定长达三天或在2-8°C下稳定长达五天。PAXgene试管可以在-20°C至-70°C的温度下冷冻,以便长期储存。
产品信息:
管材 塑料
管尺寸16x100 mm
采血量2.5 mL
管盖 BD Hemogard型闭合器™
封口颜色 红色
添加剂6.9 mL专有RNA稳定添加剂
灭菌辐射 10-6 SAL,ISO11137-1