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小肠类器官原代培养全流程

更新时间:2024-01-03 点击次数:509

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类器官原代培养全流程

实验前准备

CO2 培养箱、双人单面超净台、倒置显微镜、台式冷冻离心机、水浴锅、水浴摇床,医用冰箱、-80°冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科镊。

试剂:小肠类器官培养基,小肠类器官消化液,小肠组织保存液,小肠类器官缓冲液,硫酸庆大霉素,双抗,组织固定液,基质胶,60mm细胞培养皿, 100μm滤筛,15ml离心管,1.5ml EP管若干,4度冰盒,眼科剪刀,眼科镊。

实验流程

(1)样本准备:

将组织放入含有器官保存液的取样瓶中,4℃从医院/实验室取回。
将取样瓶消毒,组织取出放入培养皿样本拍照,并登记,大小,颜色,软硬程度,组织类型等信息。
(2)清洗,剪碎:
添加含有双抗、庆大霉素的类器官缓冲液浸泡,用眼科镊刮去肠道粘膜,肠绒毛等。在培养皿中用类器官缓冲液清洗三次(每次更换培养皿)后剪碎,剪成大约1mm3的组织块。静置2次。
(3)消化-过滤:

用组织消化液在37℃进行消化10-15min(消化过程中随时观察消化情况)。

类器官缓冲液终止消化,用枪头轻柔吹打可以看到液体变浑浊。

使用100μm孔径的筛网进行过滤,取少量滤液在镜下进行观察,可以看到明显的隐窝状组织结构。

4)离心、加胶

(5)铺板

(6)观察


欧玛生物类器官培养基系列,华雅均有现货,欢迎咨询

产品                货号       名称(英文)

结直肠癌类器官培养基 OM11 (Human) Colorectal Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人结肠类器官培养基    OM11N (Human) Colorectal Organoid Culture Medium 100ml

胃癌类器官培养基    OM12 (Human) Gastric Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胃类器官培养基    OM12N (Human) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

肺癌类器官培养基    OM13 (Human) Lung Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肺类器官培养基    OM13N (Human) Lung Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺癌类器官培养基 OM14 (Human) Pancreatic Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺类器官培养基    OM14N (Human) Pancreatic  Organoid Culture Medium 100ml

肝癌类器官培养基    OM15 (Human) Liver Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肝脏类器官培养基    OM15N (Human) Liver Organoid Culture Medium 100ml

宫颈癌类器官培养基    OM16 (Human) Cervical Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人宫颈类器官培养基    OM16N (Human) Cervical Organoid Culture Medium 100ml

食管鳞癌类器官培养基 OM17 (Human) Esophageal Squamous Cancer Organoid Culture Medium 100ml

乳腺癌类器官培养基    OM18 (Human) Breast Cancer Organoid Culture Medium 100ml

膀胱癌类器官培养基    OM19 (Human) Bladder Cancer Organoid Culture Medium 100ml

小鼠小肠类器官培养基 OM31 (Mouse) Small Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠大肠类器官培养基 OM32 (Mouse)  Large Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肝脏类器官培养基 OM33 (Mouse) Liver Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胃类器官培养基    OM34 (Mouse) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肺类器官培养基    OM35 (Mouse) Lung Organoid Culture Medium 100ml

小鼠子宫类器官培养基 OM36 (Mouse) Uterine Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胰腺类器官培养基 OM37 (Mouse) Pancreatic Organoid Culture Medium 100ml

小鼠食管类器官培养基 OM38 (Mouse) Esophageal Organoid Culture Medium 100ml

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