服务热线

15021010459
技术文章
当前位置:主页 > 技术文章 > 使用细胞冻存液的操作步骤

使用细胞冻存液的操作步骤

更新时间:2014-03-26 点击次数:1514
使用细胞冻存液的操作步骤
    (1)选择处于对数生长期的细胞,在细胞冻存液冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。
    (2)去上清液,加入含20%小牛血清的*培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。
    (3)将上述细胞分装于安瓿或冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要*封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。
    (4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时(此步可省略),再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,zui后沉入液氮中。
    细胞冻存在细胞冻存液中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。

2024 版权所有 © 重庆市华雅干细胞技术有限公司  备案号:渝ICP备14000349号-4 sitemap.xml 管理登陆 技术支持:化工仪器网

地址:重庆市江北区金渝大道153号8栋20-14 传真:023-63419626 邮件:sales@ys-bio.com

重庆市华雅干细胞技术有限公司主要经营干细胞研究 干细胞治疗产品 生物试剂 实验耗材 药物研发等产品。

关注我们

服务热线

400-021-2200

扫一扫,关注我们

Baidu
map