支原体检测试剂盒:支原体又称霉形体,没有细胞壁的原核生物,为目前发现的zui小的zui简单的原核生物。支原体细胞中*可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。它对许多抗生素具有抗性,如类胸膜肺炎微生物。
支原体检测试剂盒常规检测才能有效避免细胞支原体污染
1.常规性的进行支原体检测是保证细胞培养中不受到支原体污染影响的*途径。
2.传统的支原体检测方法需要在特殊的选择性培养基作用下对样品进行培养,时间往往达数周,费时,费力并且无法获得足够的灵敏度和特异性。
美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性,进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作,能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于*次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到,其公式如下:
Luciferase
ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP
Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT
这个反应的发生是在室温(18°C~22°C)进行的,也是荧光素酶反应的*温度。
在支原体检测试剂盒的检测原理中,zui后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。
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