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解析淋巴细胞分离液提取淋巴细胞的方法
更新时间:2014-03-31 点击次数:1637
淋巴细胞分离液是BI公司*开发的不含任何酵素、蛋白水解酶及动物组分的一种试剂。运用离子螯合技术使贴壁细胞温和的脱落,zui大程度地保留完整的细胞表面蛋白及其生物功能,长时间使用也无需担心细胞受损。
淋巴细胞分离液可适用于血清及不含血清培养细胞,贴壁更紧密的细胞可选用木瓜蛋白酶或结晶胰酶。
淋巴细胞分离液细胞漂浮密度:1.077±0.001g/ml,成分:用泛影酸葡甲胺和右旋糖苷及氯化纳等配制而成的灭菌水溶液,包装体积:250ml,贮存:4-25℃避光保存,有效期1年,启封后贮存于冰箱,使用范围:适用于人淋巴细胞分离液。
淋巴细胞分离液提取淋巴细胞的方法:
1、采取外周静脉血3ml
2、采用3ml N-S 或Hanks 液做对倍稀释处理,即总体积为6ml
3、取一中试管,加入2ml的淋巴细胞分离液,然后将6ml稀释过的血液小心加到分离液的上表面,刚开始加时,动作一定要慢要轻柔,后面可以加快速度,使分离液和血液zui终的比例为1:3,分离液界面保持清楚
4、离心,2000rpm ,20min,然后吸取PBMC
5、洗涤,将放有PBMC的离心管用N-S 充盈至10ml,混匀,2000rpm,10min,再洗涤两次,并将转速降为1000rpm,10min,即可得到PBMC
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