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HES分离红细胞

更新时间:2015-04-22 点击次数:2684

HES分离红细胞

    HES是从支链淀粉衍生出来的,是富含淀粉的复合物,其生理和化学特性主要由取代级、平均分子量决定。大量实验表明平均分子量越大对红细胞的凝集作用越强,有效提高血细胞的沉降速度,从而使血细胞与其它细胞分离。故而,使用HES沉淀法是一种的细胞分离方法。

    间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨细胞、成脂、肪胞、骨髓基质细胞、肝脏细胞、心肌细胞和神经细胞等多种细胞分化的多潜能组织干细胞,是在细胞治疗、基因治疗中有效发挥作用的理想工程细胞。 MSCs不仅存在于骨髓,也可从脐血、外周血中以及脂肪组织、肌肉、胎儿器官、大脑、牙齿中分离。UCB - MSCs的分离、筛选、增殖、分化与脐血样本的选择、培养基的差异以及分离、扩增分化过程中操作技术等多种因素有关。目前用于UCB - MSCs分离的方法有:贴壁筛选法、密度梯度离心法、流式细胞仪法和免疫磁珠法。流式细胞仪法对细胞损伤较大,免疫磁珠法价格相对较贵且由于抗原抗体反应也容易改变细胞原有特性,而HES联合密度梯度离心法常与贴壁筛选法结合使用,可提高所得UCB - MSCs的纯度,目前研究多采用此法。国内不少学者采用HES沉淀红细胞,然后再进行离心分离单个核细胞,也取得不错结果。实验证明采用随机数字表法,将每份脐血随机分入两个不同处理组,从而将脐血样本的个体差异减小到zui小程度。结果证实,HES联合密度梯度离心法获得的有核细胞数量明显多于FICOLL密度梯度离心法。

    HES分子处在红细胞之间联接而成,同时还阻碍白细胞和内皮细胞的黏附,并使平均血小板容积呈现微弱地降低,从而有轻度抑制血小板集聚的功能。脐血经HES处理后,可使红细胞沉积至试管底,对其它主要成分包括单个核细胞无影响。经这样处理后,实验时间相对较短,步骤相对较少,细胞污染几率小,从而使细胞数损失较少。结论证明,与相应的干细胞分离液联合分离使用HES沉淀法是一种的脐血单个核细胞分离方法。

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