心肌细胞培养基的广泛应用
更新时间:2015-10-19 点击次数:1194
心肌细胞,是目前和将来*的人源心肌细胞来源。
由于人类心脏的生化和分子生物学特性,其心肌细胞的很多核心功能蛋白与小鼠等模式动物不同。例如,小鼠心肌细胞主要表达α重链肌球蛋白,以适应高频率的搏动,而人类心肌细胞主要表达β重链肌球蛋白,适应低频率的搏动。此外,以Ito 和Ik为代表的钾离子通道在不同种属动物及人类心肌细胞间的表达和功能差异极大,对于动作电位形成的贡献也各不相同。
传统研究采用的心肌细胞, 主要是采用从新生或成年动物心脏分离获得的原代心肌细胞。同时,此类细胞还存在: 分离技术复杂繁琐、缺少有效的纯化方法、体外培养困难等缺陷。尤其是对于心脏生理接近人类的大型哺乳动物而言,分离原代心肌细胞的动物成本极其高昂,而获取的心肌细胞活性也更低。因此,ES/hiPS心肌细胞是此类研究的的选择由于传统原代心肌细胞在培养中存活时间极短(成年动物仅有数小时,新生动物不超过1周),绝大多数耗时较长的心脏生理和病理学研究难以采用心肌细胞开展,不得不选择复杂且成本较高的动物模型,甚至无法开展。而ES/hiPS-心肌细胞的解决了这一问题。
心肌细胞在开发方面的主要应用:
作为一种标准化的人源细胞产品,心肌细胞可以极大的促进研发、提果评价和毒性测试。从而在占绝大多数的疗效低下和具有潜在毒性的化合物进入成本高昂的阶段前,将它们排除出去。如果采用了心肌细胞进行测试,不仅能够排除具有心脏毒性的化合物,还能初步评价心血管类的疗效,极大的降低开发成本,并且提率。
心肌细胞培养基是专门为正常人类心肌细胞体外培养设计的zui适于其生长的培养基。经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(5%)。该培养基缓冲体系为重碳酸盐,在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。该培养基的配方能够选择性的促进正常人类微血管内皮细胞体外培养中的增殖和生长,并为其达到营养平衡状态提供数量上和质量上的保证。