由于人类心脏电生理学特性,其心肌细胞的去极化时程与啮齿类动物差异很大。例如,人心脏生理条件下每分钟搏动60-90次,而小鼠为500-700次,大鼠为300-400次。因此,在小动物心肌细胞模型中发现的理论,当需要进一步在验证时,由于缺失人类心肌系统,只能取用其他大型哺乳动物的原代分离心肌细胞替代。而这些细胞的来源都不稳定,实验结果的重复性也无法保证。由于*的原因,基本没有可能获得并培养原代人心肌细胞,以心肌细胞为代表的心肌细胞,是目前和将来*的人源心肌细胞来源。
心肌细胞可以极大的促进药物研发、提高药物效果评价和药物毒性测试。从而在占绝大多数的疗效低下和具有潜在毒性的化合物进入成本高昂的阶段前,将它们排除出去。例如,一般药物在经过基于HEK293等标准细胞的毒性测试后,会进一步进行较为繁琐和昂贵的膜片钳或者动物实验来测试心脏疗效或者毒性。而293细胞作为一种人胚胎肾上皮,无法对大多数心脏毒性做出反应,所以大量具有心脏毒性的备选化合物会进入到下一阶段,极大的增加了药物开放的成本。如果采用了CardioEasy心肌细胞进行测试,不仅能够排除具有心脏毒性的化合物,还能初步评价心血管类药物的疗效,极大的降低药物开发成本,并且提率。
心肌细胞培养基是专门为正常人类心肌细胞体外培养设计的zui适于其生长的培养基。经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、***、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(5%)。该培养基缓冲体系为重碳酸盐,在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。该培养基的配方能够选择性的促进正常人类微血管内皮细胞体外培养中的增殖和生长,并为其达到营养平衡状态提供数量上和质量上的保证。
心肌细胞分化培养基是在胚胎干细胞定向分化为心肌细胞的过程中,心肌特异蛋白、受体、离子通道依次发生,这个过程模拟了体内胚胎早期心肌发育。在对人ESC和iPSC不同细胞系的实验中,本培养基能得到心肌细胞分化效率比所有已发表方法都高的结果。心肌细胞分化培养基的Wnt信号传导途径,对许多物种的器官形成都具有重要作用,胚胎心脏发育也不例外。Wnt信号传导途径分为经典Wnt信号传导途径和非经典Wnt信号传导途径。对于经典Wnt信号转导通路在胚胎心肌细胞分化过程中的作用,目前存在两种相反的观点。一种观点认为:经典Wnt信号传导途径对胚胎心肌分化起抑制效应;另一种观点认为:经典Wnt信号传导途径对胚胎心肌分化起促进效应。
心肌细胞分化培养基在体外组织工程模型中,生物化学和机械信号对心肌再生起着很重要的促进作用,对人胰岛素样生长因子和三维动态微环境对脂肪干细胞向分化过程中的促进作用进行了研究。带有IGF-1基因的质粒整合到胶原-壳聚糖支架中,脂肪干细胞接种到整合质粒的支架内,未整合质粒的支架作为对照组。心肌细胞分化培养基作为分化培养基,转瓶生物反应器提供动态微环境.经2周分化培养后,检测质粒在支架内释放及表达情况、细胞在支架内的活性以及心肌功能性蛋白和基因的表达.心肌细胞分化培养基的结果表明,动态微环境能促进质粒DNA的释放和转染;IGF-1可促进脂肪干细胞在胶原-壳聚糖支架内增殖以及向心肌细胞分化;动态微环境可加强IGF-1的促增殖分化作用.因此,IGF-1和动态微环境能独立或相互促进脂肪干细胞在胶原-壳聚糖支架内活性,动态微环境还可强化IGF-1对脂肪干细胞的促分化作用.对体外构建工程化心肌组织进行心肌再生研究有着重要的指导意义。