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胰酶贴壁细胞的消化

更新时间:2016-06-23 点击次数:1351
     胰酶是自猪胰中提取的多种酶的混合物,主要为胰蛋白酶、胰淀粉酶与胰脂肪酶。按干燥品计算,每1g中含胰蛋白酶不得少于1800活力单位,胰淀粉酶不得少于21000活力单位,胰脂肪酶不得少于12000活力单位。必要时可用蔗糖或低倍胰酶稀释。
    胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱碱性条件下活性较强,胰蛋白酶能使蛋白质转化为蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉转化为糖,胰脂肪酶则能使脂肪分解为甘油及脂肪酸,从而促进消化、增进食欲。主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障碍,同时也适用于先天性胰功能不全、腹部手术和外伤胰腺切除导致的胰功能不全。或未经手术切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。
    胰酶使用注意:
    1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
    2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
   

胰酶贴壁细胞的消化:

    1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清
    2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)
    3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
    4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的*细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。

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