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神经干细胞基的使用注意事项

更新时间:2014-10-28 点击次数:1261

   神经干细胞基的使用注意事项

1.在配制*培养基前,请把间充质干细胞无动物源生长添加剂(MSCGS-xf)、青霉素-链霉素(P/S)放到2-8℃冰箱过夜解冻,然后加入到基础培养基中。
 
2.在使用*培养基前,需要把培养基放到37℃恒温水浴中预热,注意温度不要超过37℃。
 
3.请把配制好的*培养基放在4℃冰箱避光保存,并尽量在一个月内使用完。若培养基要分几次使用,请将间充质干细胞无动物源生长添加剂(MSCGS-xf)、青霉素-链霉素 (P/S)解冻按用量分装后保存。
 
4.可不包被培养瓶,但配合贴壁材料Attachin(货号BW110028)使用效果更佳。
 

免疫细胞化学染色具体方法为:

(1) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(2) 0.3%H2O2/0.05M PBS室温 30min

(3) 0.3%Triton-100/0.05M PBS 37 ℃,15min

(4) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(5) 5%羊血清/0.05M PBS 37 ℃,15min

(6) I抗(2%羊血清/0.05M PBS配) 4℃,48h

(7) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(8) II抗(2%羊血清/0.05M PBS配,1:200) 37 ℃,1.5h

(9) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(10) AB复合物(0.05M PBS配,1:100) 37 ℃,1.5h

(11) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(12) Tris-HCl缓冲液 37 ℃,15min

(13) DAB显色 20min

(14) 蒸馏水漂洗 10min×3次

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