HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人间

产品英文名称：HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium

产品中文名称：人间充质干细胞无血清培养基

    CCGmHuM 人间充质干细胞无血清培养基根据干细胞的生长需要，培养基包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质、血清替代物以 及其他补给成分。非常适用于培养哺乳类干细胞，包括脐带干细胞，骨髓干细胞，脂肪干细胞等 间充质干细胞。产品严格无菌，无病毒和支原体，性能稳定，使用 该培养基能使干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化（至少10代以内）。
           
     人间充质干细胞无血清培养基产品特点：
 1.Chemically-Defined
 2. Serum-Free
 3. Xeno-Free
  4.No Plate Coating Necessary
  5.Perform Better than FBS Medium

HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人间充质干细胞无血清培养基实验操作手册：
1. 材料和试剂准备
耗材：细胞培养瓶 corning cellbind flask
25cm2 flask：corning 3289
75cm2 flask：corning 3290
175cm2 flask：corning 3292
试剂：原代人间充质干细胞无血清培养基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor（HZ0205M ,25X）
*培养基配制：将Supplement在4℃溶解，溶解后将50ml溶液全部加入450ml Basal medium中；原代培养时需加入1X 的Adherent factor（Adherent factor：*培养基的体积比为1：24比例配制）。
传代用人间充质干细胞无血清培养基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ，450ml)+Supplement(HZ0203M ，50ml)
*培养基配制：将Supplement在4℃溶解，溶解后将50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。
细胞分离试剂： TrypLE™ Select CTS™（Gibco-A12859-01，100ml）
2. 方法
原代培养（脐带来源的MSC）
1.1 制备组织细胞团：用手术器械剥离脐带血管获得华通氏胶体，洗净血细胞，制备成1-4mm3组织小团块。
1.2 接种：将组织细胞团块按5-10mg/cm2均匀接种至细胞培养瓶中。
1.3 细胞维持：实时观察细胞生长状况，适当换液，待原代细胞形成的克隆达到约100个细胞时，可以进行细胞消化、细胞冻存或传代培养。
我们推荐细胞3-4天换液，原代培养时间大概为9-13天！
细胞传代、扩增培养
2.1细胞消化
待细胞汇合度约75%-80%左右时（9-13天左右），弃掉培养基，用DPBS（w/o Ca2+Mg2+）润洗一遍，加入适量的细胞分离液覆盖细胞表面，37度，2-5min。待细胞开始脱落时，用适量的*培养基即刻终止消化，细胞离 心，300 g，8 min，弃去上清，用*培养基重悬细胞沉淀。
2.2细胞传代
按1.5-4*103/cm2接种到细胞培养瓶中，放入二氧化碳恒温培养箱中培养。
我们推荐每3天左右进行细胞传代培养，判定传代时间为细胞在培养
瓶中汇合度约为75%-80%，不能长得过满!
如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人间充质干细胞无血清培养基过程中，有任何技术问题，我们开通了HY STEMCELL技术团队，欢迎您发邮件到pm@hystemcell.com 进行交流沟通，我们的目标是：推动中国干细胞技术走向产业和临床！

产品应用领域：

    适用于人及哺乳类来源的间充质干细胞或成体干细胞的培养，包括脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞及脂肪干细胞