GE Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液

GE Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸钠溶液。Ficoll-Paque密度梯度介质利用简单快速离心程序从少量或大量血液中有效提取高产和高纯度的活单核细胞。Ficoll-Paque PLUS是无菌即用型产品，推荐用于单个核细胞的常规分离。

产品订购信息

品牌 货号 产品描述 包装

GE 17-1440-02 Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 6 × 100 ml

GE 17-1440-03 Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 6 × 500 ml

GE 17-5442-02 Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴细胞分离液 6 × 100 ml

GE 17-5442-03 Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴细胞分离液 6 × 500 ml

GE 17-5446-52 Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 淋巴细胞分离液 6× 100 ml

欢迎您致电 重庆市华雅干细胞技术有限公司 189 2296 8205   Q 3054606584

华雅干细胞-客服中心：4000212020

GE Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸钠溶液。Ficoll-Paque密度梯度介质利用简单快速离心程序从少量或大量血液中有效提取高产和高纯度的活单核细胞。Ficoll-Paque PLUS是无菌即用型产品，推荐用于单个核细胞的常规分离。

主要特征

1. 经过严格的质量控制测试
2. 分离所得的细胞存活细胞率>90%
3. 低水平内毒素
4. 质量管理系统下生产，符合ISO 13485:2003标准（Ficoll-Paque PREMIUM）
5. 正确存储条件下稳定性至少保持3年

Ficoll-Paque淋巴细胞分离液产品分类

1. Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml单个核细胞分离液适用血液、骨髓和脐带血来源的人单个核细胞分离制备，临床研究和细胞治疗生产级别。后续可以通过培养分离得到间充质干细胞。
2. Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 单个核细胞分离液适用密度较低的人单个核细胞的富集，如间充质干细胞和单核细胞，同样应用于临床研究和细胞治疗。
3. Ficoll-Paque PLUS 用于人外周血的单个核细胞分离，仅供科研使用。

GE Ficoll-Paque 获得的单个核细胞（含淋巴细胞）悬液具有以下特点：

1. 分离所得的细胞中95 ± 5%为单个核细胞
2. 分离所得的细胞存活细胞率 > 90%
3. 可回收原始的血液样本中60 ± 20%的单个核细胞
4. 3 ± 2%的粒细胞
5. 5 ± 2%的红细胞
6.  

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Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液产品参数：

  物理状态：无色液体

  密度：1.078 g/ml

  pH范围：5.5-7.5

  内毒素活性：< 0.12 EU/ml

  有效期：3年

  保存：4℃-30℃

  成分：Ficoll-Paque PLUS是一种无菌的、即用型的试剂，含有Ficoll PM400、泛影酸钠和二钠钙EDTA。密度已经被优化，用于分离外周血的人淋巴细胞。

应用

  人外周血、骨髓和脐带血淋巴细胞分离

骨  髓、胎盘间充质干细胞分离

 密度梯度离心原理

见图，以人外周血为例，血液加入Ficoll-Paque密度梯度分离液后离心分层，从上到下分四层：

血浆层

单个核细胞层：淋巴细胞、单核细胞、血小板（骨髓和脐带血等样本还有间充质干细胞）

Ficoll-Paque分离液层：密度1.077g/mL

红细胞、粒细胞层

红细胞和多形核粒细胞比重较大，为1.092左右，而淋巴细胞和单核细胞比重较小，为1.075～1.090。Ficoll-Paque密度1.077g/mL介于两者之间，并且分离液中的Ficoll PM400是一种高聚糖，能促进红细胞凝集。

操作步骤

使用前把Ficoll-Paque density gradient media加热到18°C - 20°C。若样本量超过3mL，换用直径更大的离心管，以保证Ficoll-Paque 分离液：2.4 cm，血液样本：3.0 cm的高度。

样本制备

使用新鲜血液确保所分离的单个核细胞的活性。样本也要加热到18°C - 20°C。

1. 10mL离心管加入2mL抗凝血和等量的平衡盐溶液。

2. 颠倒或吸管混匀血液和缓冲液。

单个核细胞分离步骤

1. Ficoll-Paque试剂瓶颠倒多次混匀。

注射器法吸取Ficoll-Paque分离液：

见图，去掉聚丙烯盖，插入注射器针头。

吸管法吸取Ficoll-Paque分离液：

去掉聚丙烯盖，拉起铝环，拉开金属密封，移除银环。拿掉橡胶密封，无菌操作吸取需要的Ficoll-Paque分离液。

离心管加入3mLFicoll-Paque分离液。

稀释过的血液样本小心铺到Ficoll-Paque分离液上面。

注意：铺样本时小心不要和Ficoll-Paque分离液混合。

离心400g，30-40min。18°C - 20°C。

用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板，不要碰到单个核细胞层（图4，图5）。

无菌吸管转移单个核细胞层到无菌离心管。

洗涤分离细胞

1. 预估转移的单个核细胞的体积。加入至少3倍体积的平衡盐溶液（约6mL）。

2. 用吸管轻柔重悬细胞。

3. 离心，400-500g，10-15min，18°C - 20°C。

注意：高速离心会加速单个核细胞的回复。但是，低速离心（60-100g）能去除血小板。

4. 去掉上清。

5. 6-8mL平衡盐溶液重悬单个核细胞。

6. 离心，400-500g（或60-100g），10min，18°C - 20°C。

7. 去上清。

8. 使用下游所需液体重悬细胞沉淀。

附：平衡盐溶液配制

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